Laboratory Instruments • Chromatography

UHPLC

UHPLC adalah pengembangan HPLC yang beroperasi pada tekanan sangat tinggi sampai 1500 bar untuk menggunakan partikel kolom sub-2 μm, menghasilkan resolusi lebih tinggi, waktu analisis lebih cepat, dan sensitivitas lebih baik.

Overview

Apa itu Ultra High Performance Liquid Chromatography?

UHPLC adalah pengembangan HPLC yang beroperasi pada tekanan sangat tinggi sampai 1500 bar untuk menggunakan partikel kolom sub-2 μm, menghasilkan resolusi lebih tinggi, waktu analisis lebih cepat, dan sensitivitas lebih baik.

Untuk memisahkan dan mengkuantifikasi senyawa kompleks dalam matriks rumit dengan kecepatan 3-10x lebih cepat dari HPLC konvensional tanpa mengorbankan resolusi.

Tekanan tinggi + partikel kecil mengurangi pelebaran pita Van Deemter. Ini kritis untuk throughput tinggi di QC farmasi, screening obat, metabolomik, dan proteomik di mana waktu = biaya.

Real Example

Contoh Penggunaan

Uji kadar 7 pengotor terkait dalam obat API yang butuh 40 menit di HPLC, dapat dikerjakan 8 menit di UHPLC dengan kolom 1.7 μm dan tekanan 1000 bar.
Application

Kapan Ultra High Performance Liquid Chromatography Digunakan?

Farmasi

Analisis pengotor, stabilitas, dan bioanalisis dengan throughput tinggi.

  • Uji Pengotor Terkait
  • Uji Stabilitas Forced Degradation
  • Bioanalisis Plasma
  • Assay Kandungan

Food & Lingkungan

Screening multiresidu pestisida, mikotoksin, kontaminan.

  • Multiresidu Pestisida LC-MS/MS
  • Analisis Vitamin
  • Mikotoksin dalam Pangan
  • PFAS dalam Air

Riset & Omics

Profiling metabolit, peptida, protein kompleks.

  • Metabolomik
  • Proteomik Bottom-Up
  • Lipidomik
  • Natural Product Screening
Sample Types

Jenis Sampel

Sampel Contoh Tujuan
Sampel Cair Plasma, Urin, Ekstrak Analisis kuantitatif senyawa target dengan LOD sangat rendah.
Ekstrak Padat Pangan, Herbal, Tablet Pemisahan multi-komponen dalam matriks kompleks.
Sampel Biologis Peptida, Protein Terdegradasi Profiling proteomik dan metabolomik.
Output

Hasil Analisis

Kromatogram dengan peak sempit, resolusi tinggi, dan waktu retensi pendek.

  • Waktu Retensi tR Waktu senyawa keluar kolom. Lebih cepat 3-10x vs HPLC.
  • Resolusi Rs >2.0 Tingkat pemisahan antar 2 peak berdekatan. Kritis untuk pengotor.
  • Efisiensi Kolom N Jumlah plate teoritis. Lebih tinggi = peak lebih tajam.
Working Principle

Bagaimana Cara Kerja Ultra High Performance Liquid Chromatography?

UHPLC menerapkan persamaan Van Deemter: partikel lebih kecil = HETP lebih rendah = efisiensi lebih tinggi. Untuk mendorong fase gerak lewat kolom padat sub-2 μm, diperlukan pompa tekanan ultra-tinggi sampai 1500 bar. Sistem harus ultra-low dispersion dengan tubing, injector, dan detector cell volume sangat kecil.

  1. Sampel diinjeksikan via autosampler volume kecil 0.1-5 μL.
  2. Pompa binary/quaternary dorong fase gerak pada 400-1500 bar.
  3. Sampel terpisah di kolom sub-2 μm karena interaksi dengan fase diam.
  4. Detector UV, PDA, FLD, atau MS mendeteksi peak dengan akuisisi >40 Hz.
  5. Data diproses untuk kuantifikasi area, tR, dan resolusi.
Learn Before You Use

Pelajari Konsep Dasarnya Terlebih Dahulu

UHPLC vs HPLC

Tidak semua kolom HPLC bisa dipakai di UHPLC. Tekanan >600 bar butuh hardware khusus.

Extra-Column Dispersion

Tubing 0.005 in dan detector cell 2.5 μL wajib agar peak sempit tidak melebar.

Perawatan Kolom Sub-2 μm

Gunakan filter 0.2 μm, hindari presipitasi buffer, dan jangan melebihi tekanan max.

Transfer Metode HPLC ke UHPLC

Gunakan rumus geometri: L/dp konstan untuk mempertahankan selektivitas.

Akuisisi Data Cepat

Peak UHPLC lebar 1-3 detik, butuh data rate >20-40 Hz agar kuantifikasi akurat.
Related Products

Available Systems

Waters ACQUITY Premier UHPLC Agilent 1290 Infinity II UHPLC Thermo Scientific Vanquish Horizon UHPLC

Precision is Language. Integrity is Law